@VincPhil14 peut être qu'au moment de l'autostart le port n'est pas monté, ou que le user qui lance l'autostart n'est pas le même. Perso je ne sais pas comment marche cet autostart, qui (le user) et quand il est lancé, donc je ne sais pas répondre. c'est quoi cet autostart je suis curieux, c'est en ligne de commande, dans la GUI, ....
C'est la première fois que j'en entends parler, mais quand je veux lancer un script ou autre au démarrage je crée un service puis j'utilise systemclt (qui est fait pour) ou alors je fais mode bourrin avec lancement dans /etc/rc.local
Il existe pléthore de tutos pour ça suffit de googler pi autostart python script mais sans procédure précise de ce qui est fait, (capture d'écran ou commandes passées + script + log du script au boot pour voir ce qui deconne), pour ma part, je ne sais pas répondre
Mais ça me semble être plus un soucis de conf ou de permissions Linux qu'autre chose